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TLRs基因家族在鸭法氏囊中的表达模式及分子进化分析
TLRs 鸭 表达模式 系统进化树
2019/1/15
旨在探究TLRs基因家族（toll-like receptors，TLRs）在鸭法氏囊中的表达情况和功能差异。本研究利用qRT-PCR检测鸭法氏囊胚后发育中TLRs基因家族的表达情况，对表达模式进行聚类分析，并分别构建了TLRs启动子区和编码区的系统进化树。结果显示，TLR2a在鸭法氏囊2周龄（W2）和6周龄（W6）时期的表达水平显著高于4周龄（W4）时期（P<0.05），其余TLRs各成员在鸭法...
旨在研究TLR家族基因在产蛋高峰期和停产期鸭肠道中的表达。选择同日龄产蛋高峰期鸭20只，随机均分为两组，一组在限食7 d停产后自由采食10 d，另一组自由采食17 d。采用RT-PCR和qRT-PCR的方法，检测TLR1-1、TLR1-2、TLR2-1、TLR2-2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR15和TLR21基因在鸭十二指肠、空肠、回肠和盲肠中的表达。结果显示，10种禽类TLR...
四川麻鸭mtDNA全序列的克隆和生物信息学分析
线粒体基因组 四川麻鸭 遗传进化
2017/4/1
本研究旨在获得四川麻鸭线粒体DNA基因组全序列（mtDNA），为该遗传资源的保护与利用提供参考。研究参照近缘物种线粒体基因组序列，用Primer 6.0设计引物16对，采用PCR克隆测序技术获得四川麻鸭mtDNA基因组序列。结果表明，四川麻鸭mtDNA基因组全长16 604 bp，碱基组成为A（29.19%）、C（32.82%）、G（15.79%）、T（22.20%），包含22个tRNA基因、2个...
鸭Ccna1启动子克隆、序列分析及在鸭骨骼肌中的发育性表达
生物信息学分析 聚类 骨骼肌
2017/4/1
为研究Ccna1基因在鸭骨骼肌发育中的作用，本研究应用RT-PCR扩增和克隆了鸭Ccna1基因启动子区并作生物信息学分析，应用荧光定量PCR技术检测Ccna1基因以及参与该基因表达调控的多个肌源性转录因子在鸭胚骨骼肌组织发育过程中的表达模式。结果表明，扩增得到鸭Ccna1基因启动子2 213 bp。序列分析表明，鸭Ccna1启动子存在典型的TATA-box、CAAT-box调控元件，有MyoD、M...
本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验材料，对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉中钙蛋白酶3(calpain3，CAPN3)基因的表达及其与肌纤维性状的关联性进行了研究。采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄胸肌和腿肌中CAPN3基因表达的发育性变化。结果发现，CAPN3 mRNA在2个品种鸭早期肌肉发育中具有相似的表达模式，并表现出显著的时间特异性，而品...
本研究选择生长速度不同的高邮鸭和金定鸭为试验模型，首次对不同品种鸭胚胎期和出雏早期肌肉和肝中胰岛素样生长因子（Insulin-like growth factors，IGFs)系统基因的表达及其与体重等指标进行了相关性研究。采用实时荧光定量PCR方法研究鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄IGF-I、IGF-IR和IGFBP-3基因表达的发育性变化。结果首次证实鸭肌肉和肝IGF-I、I...
1种胞外域仅含1个配体结合区的鸭催乳素受体基因的剪接异形体克隆及基因多态性分析
鸭 催乳素受体 配体结合区 多态性位点
2013/11/29
旨在了解鸭催乳素受体的作用，应用RACE技术克隆到了1种胞外域仅含1个配体结合区的剪接异形体。序列分析表明，剪接异形体长2 535 bp，含431 bp 5′-UTR、1 884 bp编码区和220 bp 3′-UTR，可划分为11个外显子。预测蛋白含627个氨基酸，成熟蛋白603个氨基酸，N端为24个氨基酸信号肽。不同于胞外域串联2个配体结合区的典型禽类催乳素受体，预测蛋白胞外域仅含1个配体结合...
鸭TLR4基因可变剪接体的克隆、鉴定及组织表达分析
鸭 TLR4 可变剪接体 表达分析
2013/11/29
本研究旨在克隆、鉴定鸭TLR4基因的可变剪接体，并对TLR4基因的可变剪接体表达规律进行分析。根据GenBank中鸭TLR4基因的mRNA序列（登录号：JN048668）设计引物，利用RT-PCR扩增鸭CDS区，以获取TLR4可变剪接体；并通过构建雏鸭PolyI:C感染模型，利用qRT-PCR检测TLR4可变剪接体的时空表达变化。结果，获得一种鸭TLR4基因新的可变剪接体（TLR4-b），并鉴定其...
鸭CD8α基因克隆及不同禽类分子进化分析
鸭 CD8α 克隆 进化
2013/11/29
采用RT-PCR和LD-PCR技术克隆了5个鸭种（金定鸭、樱桃谷北京鸭、番鸭、绿头鸭和斑嘴鸭）CD8α基因编码区序列，结合GenBank中已有禽类（红色原鸡、北京油鸡、斑胸草雀和火鸡）的CD8α序列，采用Jmodeltest最适核苷酸替代模型筛查，使用DAMBE V4.5.2对核苷酸替换(转换/颠换)的饱和性进行检测；并采用最大似然法检测各位点承受的选择压力。测序结果表明，不同鸭种间仅发现少数点突...
旨在克隆鸭肌肉增强因子2b邻居基因（Myocyte enhancer factor 2B neighbor，Mef2bnb）的cDNA全序列，并对其进行分析，研究该基因在肌肉组织中的发育性表达规律。利用RACE技术从鸭腿肌中克隆出Mef2bnb的全长cDNA序列，应用Q-PCR技术检测了自鸭胚胎10 d至出壳1周肌肉组织中Mef2bnb基因的发育性表达。结果显示：该序列全长935 bp，包括5′非...
家鸭、媒鸭和野鸭mtDNA D-loop区的遗传变异
鸭 D-loop 遗传多样性 系统进化
2013/12/3
旨在从mtDNA水平探讨我国家鸭的遗传多样性及家鸭与野鸭间的亲缘关系。运用DNA测序方法，测定了不同地域、水域和表型性状的9种家鸭（北京鸭、高邮鸭、巢湖鸭、绍兴鸭、连城白鸭、吉安红毛鸭、文登黑鸭、云南麻鸭、建昌鸭）80个个体、4 种媒鸭（西湖野鸭、钱江野鸭、枞阳媒鸭、媒头鸭）26个个体和斑嘴鸭8个个体，共计114个个体的mtDNA Dloop区 667 bp序列。9种家鸭单倍型多样度和核苷酸多样...
鸭CYP7α1基因克隆、序列分析及组织表达研究
鸭 胆固醇7α羟化酶1基因 克隆 序列分析 组织表达
2013/12/2
旨在克隆鸭胆固醇7α羟化酶1 (CYP7α1)基因，并进一步探讨该基因的结构与功能，揭示其组织特异性表达规律。本研究以樱桃谷鸭为材料，运用同源序列克隆结合RACE技术，对鸭CYP7α1基因的cDNA全长进行克隆，并对其进行生物信息学分析及组织表达的研究。结果表明：鸭CYP7α1基因cDNA全长2 351 bp，最大开放阅读框(ORF)1 539 bp(114～1 652 bp)，共编码512个氨基...
鸭FST基因编码区克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达
鸭卵泡抑素 CDS 分子克隆 原核表达
2013/12/4
本研究旨在获取鸭卵泡抑素（FST）外源蛋白以及进一步深入了解其在肌肉发育和繁殖上的作用,采用RT-PCR方法从鸭卵巢中克隆鸭FST基因CDS序列，并将编码FST成熟蛋白的核酸片段连入原核表达载体pET-32a（+）中，转化大肠杆菌(Escherichia coli)并采用IPTG进行诱导，诱导后的蛋白经SDS-PAGE分析后用蛋白免疫技术鉴定。序列分析表明，FST基因编码区序列为1 032 bp，...
本研究旨在通过克隆鸭脂联素(Adiponectin)基因序列并进行序列分析，揭示该基因的序列特征、组织特异性表达规律，并对其进行原核表达。采用RT-PCR、5′-RACE和3′-RACE的方法从鸭脂肪组织总RNA中扩增脂联素基因cDNA片段；半定量RT-PCR检测组织表达特异性；构建原核表达载体，建立原核表达体系。从鸭脂肪组织中得到3个脂联素基因cDNA片段，克隆测序后，拼接获得了鸭脂联素基因1 ...
本研究通过卵内注射技术，注射120、100、80和0(对照组) ng·mL-1的重组人胰岛素样生长因子(rhIGF1)到孵化中的鸭胚蛋白中，并检测2日龄雏鸭胸肌发育和卵泡抑素(FST)表达的情况，探讨不同浓度rhIGF1对FST表达及鸭胸肌发育的影响。结果表明，卵内注射不同浓度的rhIGF1对雏鸭体质量的影响不显著（P>0.05）；但雏鸭胸肌质量、胸肌率随rhIGF1注射浓度的增加而升高，...