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2014年1月，霍华休斯医学研究中心在Science杂志上发表了一篇研究论文（IF: 31.027），该研究小组应用RNAi，发现以前未知的遗传基因缺失与癌变肿瘤的相关性。Schramek D等利用RNAi技术筛选抑制小鼠SCC的基因，发现编码非肌肉肌球蛋白ⅡA的Myh9基因不仅与肿瘤发展密切相关，组织特异性Myh9 RNAi与敲除Myh9基因还可诱发侵袭性SCC。研究人员证实了侵袭性及转移性的S...
NEJM发布RNAi治疗重要成果
NEJM RNAi治疗 重要成果
2013/9/25
有如一个有前景的新棒球手还未在大联赛中证实他的实力一样，RNA干扰(RNAi) 这一基因沉默技术一直未能显示它在治疗疾病中潜力。而现在一个RNAi相关成果赢得了研究者们的赞美。一项新研究证实，这种方法可以显著且安全地降低一种罕见肝病致病蛋白的水平。研究结果发表在8月29日的《新英格兰医学杂志》（NEJM）上。
慢病毒介导的HPV16-E7基因RNAi细胞模型的建立
慢病毒 宫颈癌 HPV16 E7基因
2014/3/28
建立HPV16-E7基因的RNAi细胞模型，可为进一步研究HPV16-E7蛋白作用及致癌机制提供物质前提。选择HPV16-E7基因特异的siRNA片段，构建慢病毒siRNA重组表达载体，经293FT病毒包装细胞转染产生重组病毒，并以此感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞、抗菌素筛选和分子生物学鉴定，建立了稳定表达HPV16-E7-siRNA的RNAi细胞模型。该细胞模型，对目标基因（E7）表达的抑...
RNAi(RNA interference, RNAi)是继基因打靶技术后的一种高效的研究基因功能的方法。细胞学实验和小鼠模型的研究结果表明, Pol Ⅱ型启动子可以实现组织特异的RNA干扰, 从而为鉴定基因在特定组织中的功能及作用机理提供了一个强有力的研究方法。为了能将这种方法用于转基因绵羊生产, 探讨基因与绵羊毛囊发育的关系及其作用机制等, 文章利用Pol Ⅱ型CMV启动子和毛囊组织特异表达的...
RNAi(RNA interference, RNAi)是继基因打靶技术后的一种高效的研究基因功能的方法。细胞学实验和小鼠模型的研究结果表明, Pol Ⅱ型启动子可以实现组织特异的RNA干扰, 从而为鉴定基因在特定组织中的功能及作用机理提供了一个强有力的研究方法。为了能将这种方法用于转基因绵羊生产, 探讨基因与绵羊毛囊发育的关系及其作用机制等, 文章利用Pol Ⅱ型CMV启动子和毛囊组织特异表达的...
探讨RNA干扰人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）的表达对大肠癌细胞SW480凋亡的影响。方法：构建携带hTERT小发夹干扰RNA（small hairpin RNA，shRNA）的重组表达载体pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA（简称hTERT-shRNA质粒），脂质体法转染SW480细胞，RT-PCR法检测不...
目的：通过构建携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体，获得可供转染的滴度，为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础。 方法： 根据线粒体细胞色素C氧化酶设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链，插入到pENTR/U6质粒缺口末端，连接在质粒上生成含RNAi盒的pENTR/U6载体；通过重组作用将pENTR/U6载体的RNAi盒重组到pLenti6/BLOCK-iT-Dest 载...
RNAi的作用机制及抗病毒研究进展
RNAi 抗病毒 肿瘤治疗
2009/8/7
由于RNAi具有特异性的抑制甚至关闭相关序列基因表达的特点,已应用于重大传染病治疗、肿瘤治疗、基因功能研究和新基因的发现等领域. 现对近年来有关RNAi的机制、抗病毒应用及前景作一综述.
目的：构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体，探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链，退火形成双链，连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer 2.1-U6-neo真核表达载体，双酶切及测序鉴定。使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞，G418筛选后RT-PCR、West...
人CDK2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
基因 CDK2 RNA干扰 慢病毒载体
2009/5/7
目的： 构建人细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2)基因RNA干扰慢病毒载体。〖HJ1.8mm〗方法: 利用Invitrogen公司在线软件设计人CDK2（NM001798）shRNA序列，退火形成ds oligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端，测序，再与慢病毒载体重组，测序鉴定，在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和CDK2基因重组慢病毒载体转染293FT细胞，包装成病毒后，收集细胞培...
目的：建立可诱导性沉默hTERT的 RNA干扰系统，并初步探讨端粒酶与细胞增殖调控之间的关系。方法: 构建沉默端粒酶催化亚基hTERT的Tet-on可诱导性RNAi载体psiRNA-hH1/TO-hTERTshRNA，并稳定转染表达TR的TREx-HeLa细胞，用半定量RT-PCR检测hTERT的转录后水平，TRAP法检测端粒酶活性。MTT法检测细胞的增殖，流式细胞仪和Hoechst33342染色...
抑制Smad3的pSUPER RNAi系统的构建和活性鉴定
pSUPER载体 Smad3 RNA干扰 肾小管上皮细胞
2009/4/15
抑制Smad3的pSUPER RNAi系统的构建和活性鉴定。
研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法：构建含bcr/abl RNAi序列的pNL B/A EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒，感染K562细胞，挑取稳定转化的克隆（B/A K562）。Real time PCR及Western blotting验证干扰效应；锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化；联苯胺染色观察细胞分化；E...