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日本血吸虫醛糖还原酶基因RNA干扰效应的初步研究
日本血吸虫 醛糖还原酶 RNA干扰
2014/3/24
研究siRNA诱导的日本血吸虫醛糖还原酶（SjAR）基因转录本和蛋白水平的RNA干扰（RNAi）效应。 方法 设计并合成2条针对SjAR基因的siRNA（siRNA-1和siRNA-2）和1条阴性对照siRNA（siRNA-NC）。用日本血吸虫尾蚴感染4~6周龄雌性昆明鼠（800~1 000条/鼠），13 d后灌注小鼠肝门静脉收集童虫，每（120±10）条童虫为一组，分别采用电转法和浸泡法对各...
目的 RNA原位杂交法观察弓形虫速殖子黏附和侵入小肠黏膜的部位及时间。 方法 30只BALB/c小鼠随机分为两组，实验组（24只）每鼠灌胃感染2×104个弓形虫速殖子（悬于0.2 ml PBS），对照组（6只）给予等量PBS。分别于感染后15 min、30 min、1 h、2 h、4 h和8 h各处死实验组小鼠4只和对照组小鼠1只，取十二指肠、空肠和回肠标本制备石蜡切片，并作RNA原位杂交。光...
RNA干扰技术在动物寄生线虫研究中的局限性
RNA干扰 动物 线虫 局限性
2009/4/7
RNA干扰（RNA interference，RNAi）是一种应用广泛的基因功能研究技术，不仅应用于模式生物秀丽隐杆线虫中，而且已成为鉴定基因功能高通量的筛选方法。但是，最近的研究发现，RNAi在动物寄生性线虫的应用上还存在一些问题，如：RNAi 在不同线虫体内效果差异较大，同一种线虫不同发育时期的效果差异也较大。产生这些问题的原因可能有：①RNAi传送途径的效率在不同的寄生性线虫中是不同的；②R...
阴道毛滴虫过氧化物氧化还原酶系统的RNA干扰
阴道毛滴虫 RNA干扰 过氧化物酶 硫氧还蛋白还原酶
2009/2/18
目的 用干扰RNA的方法特异性降解阴道毛滴虫细胞过氧化物酶（Prx）和硫氧还蛋白还原酶（TrxR）的mRNA，并观察其对虫体生长情况的影响。 方法 取患者阴道毛滴虫培养，用酚、氯仿法提取其基因组DNA，反转录合成双链RNA（dsRNA）后用RNase Ⅲ消化过柱，合成小分子（21～23 bp）干扰RNA（siRNA）；由脂质载体介导分A、B、C等3组转染，分别降解毛滴虫细胞Prx、TrxR及Prx...
猪囊尾蚴RNA聚合酶亚基基因的筛选及结构初探
囊尾蚴 剪接前导 基因文库 DNA指导的RNA聚合酶
2009/2/17
目的 从构建的剪切引导序列(SL)cDNA文库中筛选猪囊尾蚴相关基因。 方法 提取猪囊尾蚴总RNA,利用SL特异序列和带有噬菌体M13M4的olig(dT)为引物,反转录成cDNA,构建猪囊尾蚴SLcDNA文库。随机筛选并通过酶切、PCR鉴定阳性克隆,分析其同源性。 结果 鉴定出一 332bp的插入片段,含有204bp的开放阅读框(ORF)和 3′端20bp的polyA尾巴,经核苷酸和氨基酸序列分...