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近年来研究发现抗疟药青蒿琥酯对肺癌细胞具有抑制效应,但其作用机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨青蒿琥酯对肺癌A549细胞侵袭能力的影响。方法 MTT实验观察青蒿琥酯对体外培养的A549细胞增殖抑制作用;Transwell小室侵袭实验检测青蒿琥酯对体外A549细胞侵袭转移能力影响;构建A549细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察青蒿琥酯对A549细胞移植瘤的抑制作用,并采用Western blot检测A549...
IKBKB在人肺腺癌细胞株A549
及其耐药细胞株A549/DDP中的表达和意义
IKBKB NF-κB 耐药 肺肿瘤
2014/5/23
肺癌顺铂耐药在临床治疗中广泛存在,严重影响了肺癌患者的治疗效果,因此研究肺癌耐药机制对新药的研发和解决临床肿瘤耐药有十分重要的意义。IKBKB是组成IKK复合物重要的催化亚基之一,其对核转录因子NF-κB的激活起到重要调控作用。本研究旨在探讨IKBKB基因在肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)与其亲本肺腺癌A549细胞株中的表差异及其调控肺腺癌顺铂耐药的机制。方法 应用MTT法检测A549和A...
转录因子21(transcription factor 21, TCF21)是新近发现的抑癌基因,其在多种肿瘤中具有抑癌功能,本研究旨在探讨TCF21基因对人肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。 方法 利用慢病毒转染技术在肺癌A549细胞中高表达TCF21基因,以荧光定量PCR、Western blot分析目的基因的表达,并采用Transwell、MTT法、流式细胞术检测TCF21高表达对A5...
miRNA-192对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响
非小细胞肺癌 miR-192 顺铂 耐药性
2014/9/4
探讨抑制microRNA-192(miR-192)在非小细胞肺癌A549/DDP细胞对顺铂(DDP)耐药性方面的影响及可能机制。方法 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测人肺腺癌耐DDP细胞株A549/DDP及其亲本细胞株A549细胞中miR-192的表达水平,A549/DDP细胞转染miR-192抑制剂(inhibitor)和miR-阴性对照(NC)48h后采用qRT-PCR检测转染效...
MiR-503逆转肺癌耐药细胞株A549/DDP的耐药性及其机制研究
微小RNA 肺肿瘤 耐药
2014/4/24
临床上肺癌细胞往往出现对顺铂的耐药性,因此探讨肿瘤细胞的耐药机制,开发新的逆转耐药性的方法,对提高临床患者的受益有十分重要的意义。miRNA可通过其调控的目标基因,对多种与肿瘤细胞失控生长、抗凋亡、迁移和侵袭,甚至是肿瘤细胞对药物治疗的应答产生调控作用。本实验旨在探讨miR-503对肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP的耐药性逆转及其相关作用机制。方法 应用MTS法检测miR-503对A549/DD...
抑制JNK 信号通路下调A549 中LRP表达可增强顺铂化疗敏感性
JNK LRP SP600125 顺铂
2014/5/14
探讨在顺铂作用下的A549 细胞中JNK 信号通路与肺耐药蛋白LRP 之间的相互关系。方法:用SP600125抑制JNK 信号通路的活化,CCK-8 法检测顺铂药物敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡率,用Western blotting法检测LRP 、JNK 、P-JNK 的表达。结果:顺铂可活化JNK 信号通路,上调LRP 的表达;用SP600125抑制JNK 信号通路后,LRP 的表达下调,增强了...
探讨醉茄素A(WFA) 对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响。方法 采用0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L WFA 处理A549细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测上述浓度处理24、48、72和96h的细胞增殖抑制率,Hoechst染色和磷酯酰丝氨酸结合蛋白异硫氢酸荧光素/碘化丙啶双染法(Annexin V-FITC/PI)检...
近年来研究发现抗疟药青蒿琥酯对肺癌细胞具有抑制效应,但其作用机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨青蒿琥酯对肺癌A549细胞侵袭能力的影响。方法 MTT实验观察青蒿琥酯对体外培养的A549细胞增殖抑制作用;Transwell小室侵袭实验检测青蒿琥酯对体外A549细胞侵袭转移能力影响;构建A549细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察青蒿琥酯对A549细胞移植瘤的抑制作用,并采用Western blot检测A549...
干扰Hmgb3表达对肺腺癌A549细胞增殖的影响
RNA干扰 Hmgb3 慢病毒 A549细胞
2014/10/27
构建针对Hmgb3的shRNA诱导型慢病毒,检测诱导稳定感染细胞株干扰序列的干扰效率及其对A549细胞增殖的影响。方法 设计Hmgb3 及对照GFP shRNA序列,装入Tet-pLKO-puro 质粒,进行慢病毒包装,感染A549细胞,嘌呤霉素筛选稳定株,筛选最佳诱导浓度并诱导干扰序列表达, Western blot检测干扰效率,MTT实验检测其对A549细胞增殖的影响。结果 构建的Hmgb3 ...
芦荟多糖通过线粒体途径诱导人肺腺癌A549细胞凋亡
肺腺癌细胞 芦荟多糖 凋亡 线粒体途径
2014/4/8
观察芦荟多糖(aloe polysaccharide,AP)对人肺腺癌A549细胞的诱导凋亡作用,并初步探讨其作用机制。方法 AP作用于A549细胞后,用MTS法检测细胞生长情况,采用Hoechst荧光染色和DNA ladder检测A549细胞的凋亡情况;用Western blot法检测凋亡相关分子caspase-9,caspase-8,caspase-3和Bcl-2的表达情况;应用比色法检测ca...
通过载体介导的shRNA下调BAG-1基因(Bcl-2 associated athanogene-1)表达,探讨其对肺癌A549细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法:构建靶向BAG-1的shRNA干扰载体pGCsi-BAG-1,稳定转染A549细胞。实验组使用稳定转染pGCsi-BAG-1的细胞株(BAG-1-shRNA),阴性对照组使用无关序列质粒转染的细胞株(SC...
探讨表皮生长因子受体(EGFR)表达水平对西妥昔单抗及其介导的抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)对肺腺癌A549细胞杀伤的影响。方法 以肺腺癌A549细胞作为靶细胞,NKTm细胞作为效应细胞,将pEGFR-EGFP质粒用核转染技术导入A549细胞,免疫组织化学法检测转染组与野生组A549细胞表面EGFR蛋白的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8法检测西妥昔单抗以及西妥昔单抗介导的ADCC作用对...
CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立
CD147 慢病毒载体 转染 增殖
2013/12/4
CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列,将序列插入pEGFP载体,构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体,随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人...
已有的研究证明低氧可诱导肿瘤细胞自噬发生,自噬水平与肿瘤放疗敏感性相关,因而调控自噬信号通路是增强放疗敏感性极具潜力的治疗策略。本研究旨在探讨联合应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)下调低氧环境中人肺腺癌A549细胞的自噬水平后对其放疗敏感性的影响。方法 实验设低氧对照组及低氧+3-MA(自噬抑制剂)组,分别采用电镜检测自噬体变化,Western blot检测...